質粒 DNA 小量抽提試劑盒

本試劑盒采用改進的 SDS 堿裂解法,結合 DNA 磁珠選擇性吸附 DNA 的方法,達到快速純化質粒 DNA 的目的。適合從 1-4mL 細菌培養物中提取多至 20μg 高純度的質粒 DNA,用于測序、體外轉錄與翻譯、 限制性內切酶消化、細菌轉化等分子生物學實驗。
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質粒 DNA 小量抽提試劑盒 MN-P96-1G MN-P96-1G 96 ¥680.00
質粒 DNA 小量抽提試劑盒 MN-P96-4G MN-P96-4G 4*96 ¥1080.00
質粒 DNA 小量抽提試劑盒 MN-P96-24G MN-P96-24G 24*96 ¥5640.00
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產品簡介

本試劑盒采用改進的 SDS 堿裂解法,結合 DNA 磁珠選擇性吸附 DNA 的方法,達到快速純化質粒 DNA的目的。適合從 1-4mL 細菌培養物中提取多至 20μg 高純度的質粒 DNA,用于測序、體外轉錄與翻譯、
限制性內切酶消化、細菌轉化等分子生物學實驗。

產品信息

Rnase A: 50 mg/mL ,室溫保存。
Buffer S1:細菌懸浮液。加入 Rnase A 后,4℃保存。
Buffer S2:細菌裂解液,室溫密閉儲存。若出現沉淀,應于 37℃溫浴溶解并冷卻至室溫后再使用。
Buffer N3:中和液,室溫密閉儲存。 Beads: 磁珠溶液,4℃儲存。
Elutent:2.5 mM Tris-HCl, pH 8.5,室溫密封儲存。

操作流程

使用前準備


70% 乙醇
第一次使用前,RNase A 全部加入 Buffer S1 中,4℃儲存準備無核酸和核酸酶污染的 Tip 頭等耗材
異丙醇
磁性分離器:可選用海貍磁性分離器,Cat.60201

操作流程


1.第一次使用前,RNase A全部加入Buffer S1中,4℃儲存。

2.取1-4mL在LB培養基中培養過夜的菌液(若使用豐富的培養基,菌液體積應減半或更少),12000×g離心1min,棄上清。

3.用100μL已加入RNase A的Buffer S1懸浮細菌沉淀,懸浮需均勻,不應留有小的菌塊。

4.加入100 μLBuffer S2,溫和并充分地上下翻轉混合4-6次均勻使菌體充分裂解,直至形成透亮的溶液,此步驟不宜超過5min。

5.加入140μL Buffer N3,溫和并充分地上下翻轉混合6-8次, 12000×g離心10min。

6.吸取125μL步驟5中的離心上清于一新的1.5mL離心管中。

7.加入40 μL Beads和60 μL的異丙醇,用槍頭吹打3-5次。

表1:轉移不同上清液量和對應Beads和異丙醇體積用量

a)Beads易沉淀,使用前應搖勻,使Beads充分混勻

b)根據上清體積調整異丙醇的比例

8.室溫放置5min,放置過程中,用槍頭吹打混合2-3次。

9.將反應管置于磁力架上靜置30s,直至磁珠完全吸附至管壁,上清清澈后,吸棄液體。
a)注意勿將磁珠吸出
b)棄液體后,勿將反應管從磁力架上取出

10.加入200μL70%乙醇,在室溫下放置30s,吸棄液體。重復操作1次。
a)注意勿將磁珠吸出
b)注意在磁力架上操作,勿從磁力架上取出反應管c)請務必吸盡反應管內殘留的液體

11.讓磁珠在室溫下干燥3-5min.
a)注意在磁力架上操作,勿從磁力架上取出反應管b)在室溫下翻轉取出殘留的乙醇
c)勿使磁珠過分干燥,否則將影響DNA得率

12.移去磁力架,加入60-100μL Eluent或去離子水,用移液器吸頭輕輕吹打管壁磁珠,直至分布均勻,靜置2min。

13.將反應管置于磁力架上,靜置直至磁珠全部吸附至管壁,吸取上清至一新的離心管中,即得高純度的 DNA。

70802-Magrose OH說明書.pdf

BEAVER 質粒抽提說明書.pdf

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關于海貍

海貍公司創立于2011年底,落戶在風景秀麗的蘇州工業園區獨墅湖畔生物醫藥產業園(BioBAY)。公司以納米磁珠技術和生物材料表面技術為核心,通過試劑開發和設備技術整合,面向生物科研、體外診斷和基因檢測領域,提供科研和工業級別的納米磁珠原料、蛋白偶聯中間體、免疫磁珠、核酸提取試劑盒、輔助生物耗材及配套自動化設備等系列產品。

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